Izbira prave posode za kulturo je ključnega pomena za zagotavljanje optimalne celične rasti in eksperimentalnih rezultatov. Pri izbiri posod za celično kulturo je pomembno upoštevati dejavnike, kot so tip celice, poseben namen vaše kulture, obseg kulture, vrsta gojišča, materiali in velikost posod, površinska obdelava, pokrovi za pravilno izmenjavo plinov in njihovo združljivost z vašo laboratorijsko opremo.
Tukaj so ključni dejavniki, ki jih morate upoštevati pri izbiri prave posode za celično kulturo
1. Izberite posodo za celično kulturo glede na vrsto celic
Adherentne celice
Te celice potrebujejo površino, na katero se lahko pritrdijo in razširijo. Za sprijete celice boste potrebovali posode s površino, ki zagotavlja dovolj prostora za pritrditev in rast celic.
Primeri Bučke, obdelane s tkivno kulturo, petrijevke in plošče z več jamicami.
Suspenzijske celice
Te celice rastejo lebdeče v mediju, zato površina ne pride v poštev.
2. Izberite posodo za celično kulturo glede na velikost (prostorninska zmogljivost)
Kulture majhnega obsega
Za poskuse majhnega obsega ali presejanje z visoko zmogljivostjo so idealne manjše posode.
Primeri plošče z več vdolbinicami (plošče s 6, 24, 96 celičnimi kulturami),
Petrijevke, ali bučke T25.
Kulture velikega obsega
Če morate gojiti velike količine celic, so boljše večje posode ali bioreaktorji.
Primeri T75 in T175 bučke za celične kulture, bioreaktorji ali vrtljive bučke za suspenzijske celične kulture.
3. Izberite posodo za celično kulturo glede na površinsko obdelavo
Površine, obdelane s tkivno kulturo
Posode so predhodno obdelane za spodbujanje pritrjevanja celic, zaradi česar so primerne za adherentne vrste celic. Ti so običajno prevlečeni s snovmi, kot so kolagen, fibronektin ali druge sestavine zunajceličnega matriksa.
Neobdelane površine
Idealno za suspenzijske kulture ali kadar se celicam ni treba prilepiti na površino. Običajno se uporabljajo za celice, ki prosto rastejo v mediju.
4. Izberite posodo za celično kulturo glede na material
Polistiren, ki se običajno uporablja za uporabo v standardnih celičnih kulturah. Je jasen, omogoča enostaven vizualni pregled in dobro deluje tako za adherentne kot za suspenzijske celice.
Polikarbonat ali polipropilen se uporabljata za nekatere bioreaktorske aplikacije in za posode, ki zahtevajo več prožnosti ali posebne površinske obdelave.
Steklo, ki se uporablja za standardno tkivno kulturo, je zaradi stroškov in lomljivosti lahko primerno za posebne namene ali velike kulture.
Bučke
Za splošno celično kulturo se običajno uporabljajo T-bučke (T25, T75, T150). Ravna površina zagotavlja dobro območje za pritrditev in rast celic. Uporabljajo se lahko tako za adherentne celice kot za suspenzijske kulture, če se vzdržujejo ustrezni pogoji.
Petrijevke
Običajno za kulture v majhnem obsegu in za poskuse, ki zahtevajo opazovanje, kot so testi nastajanja kolonij.
Plošče z več jamicami
Te so uporabne za visoko zmogljive preglede in poskuse manjšega obsega. Plošče s 6, 12, 24, 48,
96, ali 384 vdolbinic je na voljo in so idealne za celične teste, sproščanje citokinov, testiranje zdravil in druge visoko zmogljive aplikacije.
Vrtilne bučke
Uporablja se za suspenzijske celične kulture, zlasti v večjih količinah, kjer je potrebno nadzorovano mešanje, da se ohrani rast celic in prepreči strjevanje celic.
Bioreaktorji
Za obsežno suspenzijsko kulturo bioreaktorji omogočajo kompleksnejši nadzor okoljskih pogojev (npr. pH, temperatura, oksigenacija) in se uporabljajo za obsežno proizvodnjo, na primer v biofarmacevtski proizvodnji.
6. Izberite posodo za celično kulturo glede na sterilnost in prezračevanje
Sterilnost
Prepričajte se, da je posoda sterilna ali sterilizirana, da preprečite kontaminacijo. Večina posod za komercialne kulture je predhodno steriliziranih, vendar vedno preverite embalažo.
Prezračevanje
Nekatere posode, kot so bučke, imajo prezračevalne pokrove ali filtre, ki omogočajo izmenjavo zraka in hkrati preprečujejo kontaminacijo. To je bistveno pri gojenju celic v pogojih visoke gostote.
7. Izberite posodo za celično kulturo glede na priročnost uporabe
Avtoklavirano proti enkratni uporabi
Nekatere posode za kulture je mogoče avtoklavirati za ponovno uporabo (npr. steklenice, nekatere plastične bučke), druge pa so za enkratno uporabo in za enkratno uporabo (npr. plastične petrijevke, plošče z več vdolbinicami).
Ravnanje in transport
Upoštevajte enostavnost prenosa celic med žilami. Na primer, plošče z več jamicami lahko zahtevajo posebne plošče za enostavno rokovanje z opremo, kot so avtomatizirani pipetorji.
8. Izberite posodo za celično kulturo glede na prostornino gojišča
Izberite posodo, ki lahko sprejme želeno količino gojišča brez zapravljanja virov. Če delate z visoko prostorninsko kulturo, bodo morda potrebne večje bučke ali bioreaktorji, medtem ko so manjše količine primerne za posodice ali krožnike celične kulture.
9. Izberite posodo za celično kulturo glede na stroške
Za enkratno uporabo proti večkratni uporabi
Plastične posode za enkratno uporabo so stroškovno učinkovite in zmanjšujejo tveganje kontaminacije, vendar so lahko drage za obsežne operacije. Steklene posode za večkratno uporabo imajo višje stroške, vendar jih je mogoče večkrat sterilizirati in ponovno uporabiti, zaradi česar so bolj ekonomične za dolgoročno uporabo.
Učinkovitost glasnosti
Prepričajte se, da je velikost posode ustrezna, da preprečite izgubo materiala, zlasti pri uporabi dragih rastnih medijev ali reagentov.
10. Izberite posodo za celično kulturo glede na specifične zahteve aplikacije
Slikanje
Če morate celice vizualizirati pod mikroskopom, izberite posode z optično čistimi materiali in ustreznimi dimenzijami za vašo slikovno nastavitev (npr. plošče z več vdolbinicami za presejanje z visoko vsebnostjo ali posode s steklenim dnom za slikanje živih celic).
Nadzorovana agitacija
Za suspenzijske celične kulture razmislite o centrifugiranih bučkah ali bioreaktorjih, ki zagotavljajo nadzorovano mešanje, da celice ostanejo enakomerno suspendirane.
Zaključek
Izbira prave posode za celično kulturo zahteva uravnoteženje več dejavnikov, vključno s tipom celice, lestvico kulture, združljivostjo materiala in posebnimi eksperimentalnimi potrebami. Pritrjene celice bodo zahtevale površine, ki spodbujajo pritrditev, medtem ko bodo suspenzijske celice koristile večje količine in vznemirjenost. Za delo v manjšem obsegu lahko zadostujejo plošče z več vdolbinicami ali T-bučke, medtem ko lahko večje kulture zahtevajo vrtilne bučke ali bioreaktorje. Vedno zagotovite, da posode izpolnjujejo vaše zahteve glede sterilnosti in ravnanja, ter upoštevajte stroškovno učinkovitost glede na vašo uporabo.
Z upoštevanjem teh dejavnikov lahko izberete optimalno posodo, ki zagotavlja prave pogoje za vašo celično kulturo in eksperimentalne cilje.