> Novice > Novice iz industrije

Zakaj celična kultura najprej lizira rdeče krvne celice?

2022-12-23

Osnovni uvod
Eritrocitni lizat je ena najbolj preprostih in enostavnih metod za odstranjevanje rdečih krvničk, to je cepitev rdečih krvničk z lizatom, ki ne poškoduje jedrnih celic in lahko v celoti odstrani rdeče krvničke. Cepitev lizata je blaga metoda odstranjevanja rdečih krvnih celic, ki se uporablja predvsem za ločevanje in čiščenje tkivnih celic, razpršenih z encimsko razgradnjo, ločevanje in čiščenje limfocitov ter odstranjevanje rdečih krvnih celic v poskusih tkivnih beljakovin in nukleinskih kislin. kislinska ekstrakcija. Tkivne celice, pridobljene z lizatom rdečih krvničk, ne vsebujejo rdečih krvničk in se lahko naprej uporabljajo za primarno kulturo, celično fuzijo, pretočno citometrijo, ločevanje in ekstrakcijo nukleinske kisline in beljakovin itd.

Navodila za uporabo
Vzorec tkivnih celic
1. Sveža tkiva so bila prebavljena s trebušno slinavko/encimom ali kolagenazo in dispergirana v enocelično suspenzijo, supernatant pa je bil zavržen s centrifugiranjem.

2. Vzemite ELS lizat iz hladilnika pri 4°C, dodajte ELS lizat celični oborini v razmerju 1:3–5 (dodajte 3–5 ml lizata 1 ml stisnjene celice), nežno pihajte in premešajte.

3. Centrifugirajte pri 800-1000 obratih na minuto 5-8 minut in zavrzite zgornjo rdečo bistro tekočino.

4. Oborjeni del smo zbrali in centrifugirali s Hankovo raztopino ali raztopino kulture brez seruma 2-3 krat.

5, če krekiranje ni dokončano/popolno, lahko ponovite koraka 2 in 3.

6. Resuspenzijske celice za nadaljnje poskuse; Če ekstrahiramo RNA, je najbolje, da to storimo v raztopini, pripravljeni iz koraka 4, z uporabo DEPC vode

Rdeče krvne celice imajo zelo kratek življenjski cikel, le 120 dni, vendar zelo hitro razmnožujejo kri in v tem primeru so še posebej sposobne celične delitve in so najhitreje deleče celice od vseh, zato je ta celica zelo dragocena, zato je zelo uporaben za celično kulturo. Zelo preprosto je, v sebi nima nobenih organelov, le celične membrane in beljakovine.

Prejšnja:Kakšne so funkcije kompleta ELISA?

Naslednji:Zahteve po reagentih in osnovni prikaz koncentracije raztopine.